سلام ، علاقه مندان به کروماتوگرافی! به عنوان تأمین کنندهصفحات TLC شیشه ای، من اغلب از یک سؤال فوق العاده مشترک پرسیده می شوم: "حداکثر تعداد نمونه هایی که می توان در یک صفحه TLC شیشه ای واحد اجرا کرد ، چیست؟" خوب ، بیایید درست به این موضوع شیرجه بزنیم و آن را تجزیه کنیم.
اول از همه ، بیایید به سرعت بیش از آنچه TLC یا کروماتوگرافی لایه ای نازک دارد ، برویم. این یک تکنیک ساده و در عین حال قدرتمند است که برای جدا کردن مخلوط ها استفاده می شود. یک صفحه TLC مانند مرحله ای است که اجزای مختلف یک مخلوط حرکات آنها را نشان می دهد. صفحات TLC شیشه ای به خصوص محبوب هستند زیرا بسیار محکم هستند و می توانند در طی فرآیند کروماتوگرافی ، سایش و پارگی خوبی را تحمل کنند.
اکنون ، به سوال بزرگ برگردید. یک اندازه - متناسب با آن وجود ندارد - همه پاسخ به حداکثر تعداد نمونه ها در یک صفحه TLC شیشه ای واحد. این به چندین عامل بستگی دارد.
اندازه صفحه
اندازه صفحه TLC شیشه ای یک عامل اصلی است. ما در بازار اندازه های مختلفی داریم ، از کوچک که برای آزمایش های سریع تا موارد بزرگتر مفید هستند که می توانند نمونه های بیشتری را کنترل کنند. یک صفحه کوچکتر ، می گویند یک 2.5 سانتی متر x 7.5 سانتی متر از نظر تعداد نمونه هایی که می تواند داشته باشد کاملاً محدود است. شما احتمالاً در حدود 3 - 5 نمونه حداکثر نگاه می کنید. دلیل این امر این است که شما باید فضای کافی را بین هر نقطه نمونه بگذارید تا مؤلفه ها در طی فرآیند جداسازی شروع به مخلوط کردن نکنند.
از طرف دیگر ، یک صفحه بزرگتر مانند 20 سانتی متر در 20 سانتی متر می تواند تعداد قابل توجهی از نمونه ها را در خود جای دهد. شما به طور بالقوه می توانید 15 - 20 نمونه را روی آن اجرا کنید. اما به یاد داشته باشید ، فقط به این دلیل که می توانید متناسب باشید که بسیاری از آنها همیشه به معنای بهترین ایده نیست.
اندازه نقطه
اندازه لکه های نمونه ای که شما اعمال می کنید نیز نقش بزرگی دارد. اگر از میکروپیپت برای استفاده از نمونه ها استفاده می کنید ، و در حال ایجاد لکه های بزرگ و چربی هستید ، می خواهید از فضای زیادی در صفحه استفاده کنید. نقاط کوچکتر ، خوب - تعریف شده به شما امکان می دهد تا نمونه های بیشتری را در خود جای دهید. در حالت ایده آل ، شما می خواهید لکه ها به قطر حدود 2 - 3 میلی متر باشند. این امر به اجزای کافی برای پخش در طی فرآیند کروماتوگرافی بدون دخالت در نقاط همسایه می دهد.
اگر لکه ها را خیلی بزرگ می کنید ، ممکن است به نقاط همپوشانی برسید ، که تمام هدف TLC را شکست می دهد. شما قادر نخواهید بود به وضوح بین اجزای نمونه های مختلف تمایز قائل شوید و نتایج شما یک آشفتگی داغ خواهد بود.
پیچیدگی نمونه
پیچیدگی نمونه هایی که در حال اجرا هستید نیز مهم است. اگر در حال کار با مخلوط های ساده هستید که فقط چند مؤلفه دارند ، احتمالاً می توانید با قرار دادن نمونه های بیشتر در صفحه ، از بین بروید. اما اگر نمونه های شما پیچیده است ، با تعداد زیادی از مؤلفه های مختلف ، آنها در طول جداسازی بیشتر پخش می شوند. این بدان معناست که شما باید فضای بیشتری را بین لکه های نمونه بگذارید و تعداد نمونه هایی را که می توانید اجرا کنید ، کاهش دهید.
به عنوان مثال ، اگر در حال تجزیه و تحلیل یک ترکیب خالص هستید ، می توانید لکه ها را به هم نزدیک کنید. اما اگر با عصاره گیاهی که حاوی یک دسته کامل از مواد شیمیایی مختلف است ، سر و کار دارید ، باید با تعداد نمونه ها محافظه کارتر باشید.
حلال رشد
نوع حلال توسعه ای که شما استفاده می کنید نیز می تواند بر تعداد نمونه های یک صفحه تأثیر بگذارد. برخی از حلال ها باعث می شوند که اجزای آن بیشتر از سایرین گسترش یابد. یک حلال بسیار قطبی ممکن است باعث شود که لکه ها سریعتر حرکت کنند و گسترده تر شوند. در این حالت ، شما باید فضای بیشتری را بین نمونه ها بگذارید و حداکثر شماره ای را که می توانید اجرا کنید ، کاهش دهید.
در سمت تلنگر ، یک حلال کمتر قطبی ممکن است منجر به لکه های جمع و جور تر شود و به شما امکان می دهد نمونه های بیشتری را روی صفحه قرار دهید. بنابراین ، هنگامی که شما در حال برنامه ریزی آزمایش TLC خود هستید ، باید خواص حلال توسعه را در نظر بگیرید.
بهترین روشها برای به حداکثر رساندن شماره نمونه
اگر واقعاً به دنبال فشار دادن هرچه بیشتر نمونه ها بر روی یک صفحه TLC شیشه ای واحد هستید ، در اینجا نکاتی وجود دارد. ابتدا از یک میکروپیپت ریز ریز استفاده کنید تا نقاط بسیار کوچک و دقیق اعمال شود. قبل از شروع مشاهده نمونه ها ، مطمئن شوید که صفحه تمیز است. هرگونه خاک یا بقایای روی صفحه می تواند بر جداسازی و اندازه لکه ها تأثیر بگذارد.
نمونه ها را به روشی سازمان یافته ترتیب دهید. می توانید از یک الگوی شبکه استفاده کنید تا مطمئن شوید که از فضا استفاده می کنید. و فراموش نکنید که هر نقطه نمونه را به وضوح برچسب بزنید. این امر هنگام تجزیه و تحلیل نتایج ، سردردهای زیادی را صرفه جویی می کند.
در مقایسه با صفحات TLC آلومینیوم
ممکن است تعجب کنید که چگونه صفحات TLC شیشه ای در مقابل جمع می شوندصفحات TLC آلومینیومبشر صفحات آلومینیومی از صفحات شیشه ای انعطاف پذیرتر و سبک تر هستند. از نظر تعداد نمونه ها ، همان عوامل اعمال می شود. با این حال ، صفحات آلومینیومی گاهی اوقات می توانند سطح کمی متخلخل تری داشته باشند ، که ممکن است باعث شود لکه ها کمی بیشتر شوند. بنابراین ، ممکن است شما نیاز داشته باشید که با اندازه نقطه و فاصله روی صفحات آلومینیومی نسبت به شیشه ها کمی بیشتر مراقب باشید.
در پایان ، در حالی که حداکثر تعداد ثابت نمونه برای یک صفحه TLC شیشه ای منفرد وجود ندارد ، با در نظر گرفتن عواملی مانند اندازه صفحه ، اندازه نقطه ، پیچیدگی نمونه و حلال توسعه ، می توانید تعداد مطلوب آزمایش خود را مشخص کنید. این که آیا شما یک محقق در یک آزمایشگاه هستید ، دانشجویی که طناب های کروماتوگرافی را یاد می گیرید یا شخصی در صنعت ، بیشترین استفاده را از صفحات TLC خود دارید ، بسیار مهم است.
اگر در بازار صفحات TLC شیشه ای با کیفیت بالا هستید یا در مورد نحوه استفاده مؤثر از آنها سؤال دارید ، ما برای کمک به اینجا هستیم. برای شروع مکالمه در مورد نیازهای خاص خود و اینکه چگونه می توانیم در سفر کروماتوگرافی شما به شما کمک کنیم ، به ما دسترسی پیدا کنید.
منابع
- Snyder ، LR ، Kirkland ، JJ ، & Glajch ، JL (2010). توسعه روش HPLC عملی. ویلی
- Fried ، B. ، & Sherma ، J. (Eds.). (2004). کتابچه راهنمای کروماتوگرافی نازک - لایه. مارسل دکر.